北京欧林格生物科技有限公司

lipX plus 转染试剂


  • LipoX plus 高效转染试剂
货号 包装 价格
oligo1002 -1ml 1ml 1200元
oligo1002-1.5ml 1.5ml 1500元
  • 适用范围及特点
  1. 适用于细胞系、肿瘤细胞等细胞的质粒的转染
  2. 适用于质粒的瞬时转染
  3. 转染效率高且稳定,在有无血清的情况下均可获得很好的转染效率
  4. 转染程序简单,易于操作
  • 产品的运输及储存

 冰袋运输,4℃存放一年以上。

  • 使用方法

下列步骤适用于24孔板培养的哺乳动物细胞,至于其他培养材料,请参考转染规模调整,所有数量和体积均是按孔计算。大部分细胞系所使用的DNA(ug)与LipoX Plus Reagent(uL)的比值为1:2到1:3,转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。
A.贴壁细胞:转染前一天每孔0.5-2×105个细胞接种于500ul不含抗生素的培养基中,在转染时细胞可长至 70-90%汇合度。

悬浮细胞:在配制转染液前每孔4-8×105个细胞接种于500ul不含抗生素的培养基中。

B.转染液制备,每孔细胞用量如下:

①用50ulOpti-MEM低血清培养基(或者其他无血清培基)稀释质粒DNA,轻轻混匀。

②使用前轻轻摇匀LipoX Plus Reagent,然后取适量LipoX Plus在50ul Opti-MEM培养基中稀释,室温孵育5min。

注意:请在 25 min 内进行下一步操作。

③将前两步所稀释的 DNA 和LipoX Plus Reagent混合(使总体积为 100 ul),轻轻混匀, 室温放置 20 min(溶液可出现浊)。
注意:转染复合物常温下可在 6 h 内保持稳定。

C.在每孔细胞中加入100 ul转染液。

D.按照1:1000的比例加入转染增强液,轻轻摇匀。

E.37℃培养18-48 h后检测基因表达,转染4-6 h后可更换培养基。

 

培养材料 接种培养基 稀释用Opti-M EM

DNA(DNA转染)

Lipo(DNA转染)

96孔板 100uL 2×25 ul

0.2 μg

0.5 ul

24孔板 500 ul 2×50 ul

0.8 μg

2.0 ul

12孔板 1mL 2×100 ul

1.6 μg

4.0 ul

6孔板 2mL 2×250 ul

4.0 μg

10 ul

60mm 5mL 2×0.5 m L 8.0 μg

20 ul

10cm 15mL 2×1.5 m L 24 μg

60 ul

  • 注意事项

1.使用高纯度的DNA 或RNA有助于获得较高的转染效率。

2.转染前细胞必须处于良好的生长状态。

3.需自备不含抗生素的无血清培养液或 Opti-MEM®培养液或普通的DMEM培养液。

4.LipoX Plus Reagent转染试剂不能vortex 或离心,宜缓慢晃动混匀。

5.LipoX Plus Reagent转染试剂使用后请立即盖好盖子,避免长时间暴露在空气中,影响转染效率。

6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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