北京欧林格生物科技有限公司

慢病毒浓缩试剂

使用说明

产品简介：

慢病毒浓缩液是基于沉淀法浓缩纯化慢病毒，纯化过程中无需使用高速离心机进行长时间离心，全部纯化时间最短仅需2小时左右。可将病毒液浓度提高 30‐100 倍，病毒回收率90%以上。我司慢病毒纯化试剂成分经过优化，在病毒纯化过程中可以保持慢病毒活性。病毒在该试剂中可保持稳定 24 小时以上。

规格：

保存：

本品在 4℃可保存 6 个月，如需长期保存可‐20℃冻存。

NOTE：该试剂解冻后需要沉淀溶解涡旋混匀后才能使用。

所需试剂、耗材和仪器： 冷冻离心机（50ml 或 15ml 容量）；0.45μm 过滤器（推荐使用 Millipore 低蛋白结合滤膜 PES 或 PVDF）；无菌 PBS 溶液。

其他所需试剂、耗材和仪器：

冷冻离心机（50ml 或 15ml 容量）；0.45μm 过滤头（推荐低蛋白结合滤膜 PES）；无菌 PBS 溶液

操作步骤

1. 3000rpm离心去除细胞碎片，上清液用0.45um过滤慢病毒上清液；
2. 每30ml过滤后的病毒初始液，加入慢病毒浓缩液母液7.5 ml；
3. 每20～30min混合一次，共进行3-5次；
4. 4℃度沉淀1.5h或者放置过夜；
5. 4度，4000 g，离心 20min；
6. 吸弃上清，静置管子1～2分钟，吸走残余液体；
7. 加入适量的慢病毒溶解液（PBS）溶解慢病毒沉淀；
8. 集中后的病毒悬液分装成50 μl每份，保存在成品管中。用碎干冰速冻后储存在-80 ℃。

注意事项

1. 45um的过滤头过滤病毒液后的步骤要无菌操作
2. 推荐使用45um的过滤头，0.22um的会有一部分病毒损失
3. 病毒沉淀时要保持低温，冰浴或者4°C保持温度
4. 水平转子离心，病毒都在离心管底部；角转子离心，病毒会在离心管侧面沉淀，要注意吹打下去一起重悬。