Luciferase稳转细胞株

构建LUC稳转细胞株通常包括以下关键步骤：

①载体选择

常用载体：慢病毒（Lentivirus）、逆转录病毒（Retrovirus）或质粒载体（如pGL4系列）。

可搭配抗性基因（如Puromycin、Neomycin）便于筛选。

②细胞转染/感染

通过脂质体转染、电转或病毒感染方式将LUC基因导入细胞。

③抗生素筛选

加入Puromycin等抗生素，筛选出成功整合LUC基因的细胞。

④功能验证

体外检测荧光素酶活性。

体内验证（小鼠皮下或原位移植瘤模型+活体成像）。

LUC稳转细胞株的核心应用：

（1）肿瘤研究：实时监测肿瘤生长与转移

将LUC标记的肿瘤细胞（如A549-LUC、4T1-LUC）移植到小鼠体内，通过活体成像系统（IVIS）动态观察肿瘤的生长、转移及对治疗的反应。

适用于原位瘤、转移瘤、循环肿瘤细胞（CTC）等研究。

（2）药物筛选与药效评估

在抗肿瘤药物开发中，LUC稳转细胞株可快速评估药物对肿瘤细胞的抑制效果。

例如：测试PD-1/PD-L1抑制剂对肿瘤免疫微环境的影响。

（3）干细胞与免疫细胞追踪

用于CAR-T细胞、间充质干细胞（MSCs）等治疗性细胞的体内迁移及存活研究。

（4）微生物与病毒感染研究

如构建LUC标记的细菌或病毒，研究其在宿主体内的动态分布。