定义：荧光标记细胞是指将荧光蛋白或荧光素酶报告基因，通过转基因技术导入宿主细胞中表达，从而实现对细胞状态、行为或分子过程的可视化追踪。常用的荧光蛋白包括绿色荧光蛋白（GFP）和红色荧光蛋白（RFP）等。
原理：荧光标记细胞系的构建通常通过慢病毒载体介导，具体过程如下：
a.构建携带荧光蛋白（如GFP、mCherry）或报告基因（如Luciferase）的慢病毒载体，进行病毒包装以获得具有感染性的慢病毒颗粒。
b.慢病毒通过VSV-G包膜蛋白与宿主细胞膜上的磷脂成分发生非特异性结合，介导病毒内吞。进入细胞后，病毒释放RNA基因组，在逆转录酶作用下逆转录为前病毒DNA，在整合酶作用下期随机整合到宿主基因组中，实现荧光蛋白基因的表达。
c.最后通过抗生素（如嘌呤霉素）筛选或流式细胞术分选表达荧光蛋白的细胞，建立荧光细胞系。
用途：荧光标记细胞系广泛应用于基础研究和药物开发等多个领域，常见用途见下表
原理：荧光标记细胞系的构建通常通过慢病毒载体介导，具体过程如下：
a.构建携带荧光蛋白（如GFP、mCherry）或报告基因（如Luciferase）的慢病毒载体，进行病毒包装以获得具有感染性的慢病毒颗粒。
b.慢病毒通过VSV-G包膜蛋白与宿主细胞膜上的磷脂成分发生非特异性结合，介导病毒内吞。进入细胞后，病毒释放RNA基因组，在逆转录酶作用下逆转录为前病毒DNA，在整合酶作用下期随机整合到宿主基因组中，实现荧光蛋白基因的表达。
c.最后通过抗生素（如嘌呤霉素）筛选或流式细胞术分选表达荧光蛋白的细胞，建立荧光细胞系。
用途：荧光标记细胞系广泛应用于基础研究和药物开发等多个领域，常见用途见下表
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方法 |
应用方向 |
具体说明 |
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标记肿瘤细胞 |
疾病模型构建 |
构建肿瘤转移模型，观察肿瘤细胞在体内的迁移与增殖 |
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结合CRISPR/Cas9系统 |
基因编辑验证 |
通过引入荧光标签筛选基因编辑成功的细胞（如同源重组） |
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监测荧光强度变化 |
药物筛选与毒性评估 |
评估药物对细胞增殖、凋亡或特定靶点的影响（如荧光素酶报告系统） |
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活体成像、共培养实验 |
细胞追踪或示踪 |
用于研究干细胞或肿瘤细胞的迁移、分化等过程 |
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建立持续表达荧光基因的细胞系 |
稳转细胞系构建 |
用于基因功能研究、信号通路分析，药物筛选 |
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荧光蛋白与特定启动子偶联（NF-kB启动子） |
动态检测基因表达 |
实时监测细胞状态或信号通路变化 |
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