服务优势
一站式构建平台：提供从稳转细胞株到重组蛋白生产的一站式服务
传代稳定：细胞株代次稳定性＞15代，满足长期实验需求
严格质控：细菌/支原体双重检测，活率达标，确保无污染高质量交付
全周期技术保障：专属技术支持全程跟进，定期反馈项目进展，保障交付效率
稳转株构建流程
慢病毒载体构建→慢病毒包装→稳转细胞株建立
实验周期及交付标准：
1.实验周期：4-8周
2.交付标准：稳转细胞株、WB验证结果、qpcr验证结果、侵染荧光图片、测序验证结果、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）
需确认的信息
1. 需稳转的细胞株，如a549稳转细胞系构建、hct116稳转细胞系构建、hela稳转细胞系构建、hepg2稳转细胞系构建、mcf-7稳转细胞系构建等
2. 基因种属及ID号
3. 基因序列信息
用转染质粒或病毒侵染的方法将构建好的含靶基因的载体导入细胞，根据不同的基因载体中所含的抗性标志选用相应的药物进行筛选混合阳性克隆。针对瞬时转染，外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量很少，能够满足小量蛋白的制备，大量生产成本很高。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛运用的稳转株构建方法，具有高效整合，目标细胞广泛等特点。
您可能需要的配套产品：
1.支原体检测试剂盒：
支原体污染是细胞培养领域的一个普遍性问题，实验室细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。支原体直径约为0.1-0.3μm，且具有变形能力，可透过常见的过滤头（0.22-0.45 μm），因此常规的过滤除菌的方法不能将其去除，细胞常用的抗生素（青霉素、链霉素）也对支原体无效。
支原体可通过细胞系之间交叉污染，操作人员的口腔、皮肤造成污染，或者血清等添加物而带入污染。支原体无法通过常规的光学显微镜观察到，不会引起培养基混浊，因此细胞被支原体污染一般难以察觉。
使用荧光染料进行DNA荧光染色，用支原体rRNA特异性的探针进行杂交，ELIAS检测，PCR等。这些方法中，PCR是简便灵敏的。本制品通过PCR方法检测培养细胞等生物材料中的支原体，所用引物为根据支原体 16S-23S rRNA 序列保守区域设计，只特异性扩增支原体DNA，检出灵敏度与特异性均较高。PCR 扩增及电泳分析只需数个小时，操作方便简单。
2.支原体清除试剂：
支原体会消耗必须氨基酸，影响细胞生长速率，促进代谢物积累，改变细胞形态，影响DNA、RNA以及蛋白质的合成，抑制细胞因子表达，改变被污染细胞的基因表达谱，诱导染色体畸变。我司的支原体高效清除剂能强烈的作用于感染的细胞支原体，以较低的作用浓度杀灭此污染物。不仅可用于细胞株，还可应用于敏感和易分化的细胞，如各类原代细胞、干细胞、上皮样细胞系。本产品经过了上百种细胞的测试和长期的实验验证，仅12小时就可以显著抑制支原体生长，1-2周左右即可清除支原体污染，且不影响细胞本身的代谢，完美兼具特异性和高效清除支原体的特点，且对细胞温和无损伤，最大程度上挽救您的珍贵细胞。
3.慢病毒浓缩试剂：
慢病毒浓缩液是基于沉淀法浓缩纯化慢病毒，纯化过程中无需使用高速离心机进行长时间离心，全部纯化时间最短仅需2小时左右。可将病毒液浓度提高 30‐100 倍，病毒回收率90%以上。我司慢病毒纯化试剂成分经过优化，在病毒纯化过程中可以保持慢病毒活性。病毒在该试剂中可保持稳定 24 小时以上。
4.慢病滴度检测卡：
本产品用于HIV-1 P24蛋白的快速检测，以快速评估相关慢病毒载体和假病毒包装效率（P24蛋白是慢病毒外壳中含量最大的标志性蛋白）。检测卡由层析膜、样品垫、金标垫、层析膜、吸水纸、背板和检测卡壳等结构组成。采用双抗体夹心免疫层析的原理，样本中的抗原在侧向移动的过程中与胶体金标记的P24特异性单克隆抗体1结合，形成抗原-抗体复合物，继续向前方流动和NC膜检测线上P24特异性单克隆抗体2结合，形成双抗体夹心复合物。如果样本含有P24抗原，检测线T显红色，结果为阳性，显色越深，表明样品中P24抗原/慢病毒含量越多；反之，检测线T不显色，结果为阴性。
5.慢病毒包装试剂盒：本试剂盒由优化的慢病毒包装辅助质粒混合物（Packaging Mix）、表达eGFP蛋白的对照质粒（eGFP Control）和高效的转染试剂（Transfection Reagent）组成，具有慢病毒包装时间周期短（一周之内即可获得纯化好的高滴度慢病毒）和病毒滴度高的优势，可应用于针对不同基因和药物靶标的细胞学实验和整体动物实验。非常适合于病毒包装初试者。
6.无血清冻存液：
CELLSAVING是一种无血清细胞冻存液，通用于各种动物细胞株（肿瘤细胞和常规细胞），冻存细胞可在-80℃长期保存（>5年）。CELLSAVING配方成分明确，不含动物来源性蛋白，不含血清，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全。该冻存液含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分，提高细胞存活率和活力，亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。
产品特色
Ø 即用型细胞冻存液
Ø 直接冻存于-80℃冰箱，长期保存（>5年），不需要程序性降温
Ø 高安全性，病毒、病菌和支原体等污染可能性低
Ø 细胞存活率和活力高，批次性差异小
7.荧光素酶检测试剂盒：
萤光素酶检测试剂盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit)是一种以萤光素(luciferin)为底物来检测萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)活性的试剂盒。
萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化luciferin氧化成oxyluciferin。在luciferin氧化的过程中，会发出生物萤光(bioluminescence)。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行测定。
一站式构建平台：提供从稳转细胞株到重组蛋白生产的一站式服务
传代稳定：细胞株代次稳定性＞15代，满足长期实验需求
严格质控：细菌/支原体双重检测，活率达标，确保无污染高质量交付
全周期技术保障：专属技术支持全程跟进，定期反馈项目进展，保障交付效率
稳转株构建流程
慢病毒载体构建→慢病毒包装→稳转细胞株建立
实验周期及交付标准：
1.实验周期：4-8周
2.交付标准：稳转细胞株、WB验证结果、qpcr验证结果、侵染荧光图片、测序验证结果、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）
需确认的信息
1. 需稳转的细胞株，如a549稳转细胞系构建、hct116稳转细胞系构建、hela稳转细胞系构建、hepg2稳转细胞系构建、mcf-7稳转细胞系构建等
2. 基因种属及ID号
3. 基因序列信息
用转染质粒或病毒侵染的方法将构建好的含靶基因的载体导入细胞，根据不同的基因载体中所含的抗性标志选用相应的药物进行筛选混合阳性克隆。针对瞬时转染，外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量很少，能够满足小量蛋白的制备，大量生产成本很高。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛运用的稳转株构建方法，具有高效整合，目标细胞广泛等特点。
您可能需要的配套产品：
1.支原体检测试剂盒：
支原体污染是细胞培养领域的一个普遍性问题，实验室细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。支原体直径约为0.1-0.3μm，且具有变形能力，可透过常见的过滤头（0.22-0.45 μm），因此常规的过滤除菌的方法不能将其去除，细胞常用的抗生素（青霉素、链霉素）也对支原体无效。
支原体可通过细胞系之间交叉污染，操作人员的口腔、皮肤造成污染，或者血清等添加物而带入污染。支原体无法通过常规的光学显微镜观察到，不会引起培养基混浊，因此细胞被支原体污染一般难以察觉。
使用荧光染料进行DNA荧光染色，用支原体rRNA特异性的探针进行杂交，ELIAS检测，PCR等。这些方法中，PCR是简便灵敏的。本制品通过PCR方法检测培养细胞等生物材料中的支原体，所用引物为根据支原体 16S-23S rRNA 序列保守区域设计，只特异性扩增支原体DNA，检出灵敏度与特异性均较高。PCR 扩增及电泳分析只需数个小时，操作方便简单。
2.支原体清除试剂：
支原体会消耗必须氨基酸，影响细胞生长速率，促进代谢物积累，改变细胞形态，影响DNA、RNA以及蛋白质的合成，抑制细胞因子表达，改变被污染细胞的基因表达谱，诱导染色体畸变。我司的支原体高效清除剂能强烈的作用于感染的细胞支原体，以较低的作用浓度杀灭此污染物。不仅可用于细胞株，还可应用于敏感和易分化的细胞，如各类原代细胞、干细胞、上皮样细胞系。本产品经过了上百种细胞的测试和长期的实验验证，仅12小时就可以显著抑制支原体生长，1-2周左右即可清除支原体污染，且不影响细胞本身的代谢，完美兼具特异性和高效清除支原体的特点，且对细胞温和无损伤，最大程度上挽救您的珍贵细胞。
3.慢病毒浓缩试剂：
慢病毒浓缩液是基于沉淀法浓缩纯化慢病毒，纯化过程中无需使用高速离心机进行长时间离心，全部纯化时间最短仅需2小时左右。可将病毒液浓度提高 30‐100 倍，病毒回收率90%以上。我司慢病毒纯化试剂成分经过优化，在病毒纯化过程中可以保持慢病毒活性。病毒在该试剂中可保持稳定 24 小时以上。
4.慢病滴度检测卡：
本产品用于HIV-1 P24蛋白的快速检测，以快速评估相关慢病毒载体和假病毒包装效率（P24蛋白是慢病毒外壳中含量最大的标志性蛋白）。检测卡由层析膜、样品垫、金标垫、层析膜、吸水纸、背板和检测卡壳等结构组成。采用双抗体夹心免疫层析的原理，样本中的抗原在侧向移动的过程中与胶体金标记的P24特异性单克隆抗体1结合，形成抗原-抗体复合物，继续向前方流动和NC膜检测线上P24特异性单克隆抗体2结合，形成双抗体夹心复合物。如果样本含有P24抗原，检测线T显红色，结果为阳性，显色越深，表明样品中P24抗原/慢病毒含量越多；反之，检测线T不显色，结果为阴性。
5.慢病毒包装试剂盒：本试剂盒由优化的慢病毒包装辅助质粒混合物（Packaging Mix）、表达eGFP蛋白的对照质粒（eGFP Control）和高效的转染试剂（Transfection Reagent）组成，具有慢病毒包装时间周期短（一周之内即可获得纯化好的高滴度慢病毒）和病毒滴度高的优势，可应用于针对不同基因和药物靶标的细胞学实验和整体动物实验。非常适合于病毒包装初试者。
6.无血清冻存液：
CELLSAVING是一种无血清细胞冻存液，通用于各种动物细胞株（肿瘤细胞和常规细胞），冻存细胞可在-80℃长期保存（>5年）。CELLSAVING配方成分明确，不含动物来源性蛋白，不含血清，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全。该冻存液含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分，提高细胞存活率和活力，亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。
产品特色
Ø 即用型细胞冻存液
Ø 直接冻存于-80℃冰箱，长期保存（>5年），不需要程序性降温
Ø 高安全性，病毒、病菌和支原体等污染可能性低
Ø 细胞存活率和活力高，批次性差异小
7.荧光素酶检测试剂盒：
萤光素酶检测试剂盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit)是一种以萤光素(luciferin)为底物来检测萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)活性的试剂盒。
萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化luciferin氧化成oxyluciferin。在luciferin氧化的过程中，会发出生物萤光(bioluminescence)。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行测定。
| 1.质量保证 | 2.发货时间 | 3.售后处理 |
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