原理:
TUNEL法全称是末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法,核心原理很简单:细胞凋亡时,染色体DNA会发生断裂,产生大量游离的3'-羟基末端。末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)能特异性识别这些缺口,将带有荧光标记或生物素标记的dUTP连接到DNA的3'-羟基末端。之后通过荧光显微镜观察荧光信号,或用免疫组化方法检测生物素标记,就能精准定位并定量凋亡细胞。简单来说,TUNEL法就像给凋亡细胞的DNA缺口“贴标签”,通过标签的信号找到凋亡细胞。和其他检测方法相比,它能精准区分凋亡细胞与坏死细胞、正常细胞,这也是它被广泛应用的关键原因。搞懂这个原理,后续实验操作时就能更清晰地知道每一步的目的,避免盲目操作。
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