原理：
基于MTT（3-（4，5）-二甲基噻唑-2,5-二苯基四唑溴化盐）的分析方法是一种用于评估活细胞数量的技术。MTT是一种黄色染料，能够接收氢离子并与活细胞线粒体中的呼吸链发生作用。在这一过程中，琥珀酸脱氢酶和细胞色素C会促使MTT的tetrazolium环开裂，进而形成蓝色的formazan结晶。值得注意的是，这种结晶的生成量与活细胞的数量成正比，因为死细胞由于缺乏琥珀酸脱氢酶而无法还原MTT。溶解生成的formazan结晶可以使用含有50% N，N-二甲基甲酰胺和20% 十二甲基磺酸钠（pH 4.7）的MTT溶解液，或者DMSO作为替代溶剂。通过酶标仪测定490 nm波长下的光密度（OD值），我们可以准确地了解到活细胞的数量。准备材料：
10% 胎小牛血清、MTT 溶液、DMSO
96 孔板、离心机、酶联免疫监测仪
步骤：
1.细胞接种：使用含有10%胎小牛血清的培养液，将细胞制备成单个细胞悬液；每个孔接种1000至10000个细胞，接种到96孔板中，每孔加入200ul的培养液，确保细胞均匀分布。
2.细胞培养：在标准的细胞培养条件下，将96孔板放入培养箱中；培养3至5天，具体时间根据实验目的和细胞生长特性来确定。
3.MTT处理与显色：在培养结束后，向每个孔中加入20ul的MTT溶液（浓度为5mg/ml，用PBS配制）；继续孵育4小时，使MTT与活细胞内的代谢物反应；终止培养后，小心吸去孔内的培养上清液。对于悬浮细胞，需要先进行离心，然后吸去上清液；向每个孔中加入150ul的DMSO，轻轻振荡10分钟，确保生成的formazan结晶完全溶解。
4.光密度测定：在酶联免疫监测仪上，选择490nm的波长；测定每个孔的光吸收值，即OD值。记录每个孔的OD值，并以时间为横坐标，OD值为纵坐标，绘制细胞生长曲线。
通过这一系列的步骤，我们可以定量地评估细胞在培养过程中的增殖情况。OD值的变化直接反映了细胞数目的变化，从而帮助我们了解细胞的生长规律和增殖动力。这一实验方法广泛应用于生物学、医学和药物筛选等领域，为科研工作者提供了有力的工具。